红细胞裂解液ACKLysisBuffer江苑生物

产品简介

红细胞裂解液（Red Blood Cell Lysis Buffer，或称ACK Lysis Buffer），是一种经典的用于从人或鼠等的血液或组织样品中去除无核红细胞的裂解液，几乎不损伤淋巴细胞（lymphocyte）或其它有核细胞。本产品是利用细胞内渗透压浓度差而导致细胞膜胀破的原理裂解红细胞。主要成分包含氯化铵、碳酸氢钾、Na₂EDTA。因铵根离子无法通过细胞膜，而其他离子可以通过，造成细胞内外的离子浓度差异，外部水分扩散至细胞内，使红细胞膨胀，达到裂解效果。

经红细胞裂解液裂解得到的组织细胞中不含红细胞，可进一步用于淋巴细胞的分离纯化、原代培养、细胞融合、流式细胞分析、核酸与蛋白的提取等。本裂解液适用于人，大小鼠等哺乳动物新鲜血液，不适用于有核红细胞的裂解，例如鸟或禽类的红细胞。本产品经过无菌处理。

保存条件

常温配送。4 ºC保存，1年有效。

注意事项

1．本产品为无菌试剂，使用时请注意无菌操作，避免细菌污染。

2．通常情况下，血液样品与红细胞裂解液按1:3比例裂解，对一些特殊病例如白血病、红细胞增多症等，建议采用1:4或更高比例以结果。

3．在离心洗涤后，如发现极微量的红细胞，可继续试验，不会影响后续检测。

4．本产品仅用于科学研究，不得用于临床诊断和，不得用于食品和药品，不得存放于普通住宅内。

5．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

对于组织细胞样本：

1．新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。

2．加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2 min。例如细胞沉淀的体积为1 mL，则加入3-5 mL的红细胞裂解液。本步骤在室温或4℃操作均可。

3．400-500 g离心5 min，弃红色上清。4ºC离心效果更佳。

4．如果发现红细胞裂解不，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

5．洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500 g离心2-3 min，弃上清。可再重复1次，共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4ºC离心效果更佳。

6．根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

对于组织细胞样本无需洗涤的操作：

1．新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。

2．对于0.2 mL细胞沉淀加入1 mL红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2 min。本步骤在室温或4ºC操作均可。

3．加入15-20 mL PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，混匀。

4．400-500 g离心5 min，弃红色上清。4ºC离心效果更佳。

5．如果发现红细胞裂解不，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

6．根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

说明：对于常规步骤，多一步洗涤过程中的离心，但可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好一些，同时不需要大体积的离心管。步骤少了一次离心，但洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。

对于血液样本：

1．取新鲜抗凝血，400-500 g离心5 min，弃上清。

2．加入6-10倍细胞体积的红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解1-2 min。例如细胞沉淀的体积为1 mL，则加入6-10 mL的红细胞裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。注意：对于鼠的血液，裂解1-2 min已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至4-5 min，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。

3．400-500 g离心5 min，弃红色上清。 4ºC离心效果更佳。

4．如果发现红细胞裂解不，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

5．洗涤1-2次：加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，重悬沉淀，400-500 g离心2-3 min，弃上清。可再重复1次，共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4ºC离心效果更佳。

6．根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

注意：对于微量或少量的血液样品，可以在步中不进行离心弃上清的操作，直接在二步中加入10倍血液体积的红细胞裂解液，并在室温或4ºC裂解4-5 min。对于鼠的血液，裂解4-5 min已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至10 min，但通常不宜超过15 min，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。后续步骤相同。

对于血液样本无需洗涤的操作：

1．每1 mL新鲜抗凝血中加入10 mL红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解4-5 min。本步骤在室温或4度操作均可。注意：对于鼠的血液，裂解4-5 min已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间至10 min，但通常不宜超过15 min，并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。

2．加入20-30 mL PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，混匀。

3．400-500 g离心5 min，弃红色上清。4ºC离心效果更佳。

4．如果发现红细胞裂解不，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

5．根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

说明：对于常规步骤，多一步洗涤过程的离心，但可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好一些，同时不需要大体积的离心管。步骤少了一次离心，但洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。